Motsoako oa qPCR o motala oa 2× SYBR (o nang le ROX e phahameng)

Likarolo tsa sehlahisoa

Sehlahisoa sena, 2×SYBR green qPCR MIX, se tla ka phaepheng e le 'ngoe e nang le likarolo tsohle tse hlokahalang bakeng sa ho holisa le ho lemoha PCR, ho kenyeletsoa Taq DNA poLymerase, SYBR green I dae, High ROX Reference Dye, dNTPs, Mg2+, le PCR buffer.
Dae ea SYBR green I ke dae e tala e fluorescent e tlamang ho DNA e nang le marapo a mabeli (DNA e nang le marapo a mabeli, dsDNA) sebaka sa double helix minor groove. SYBR green I e fluorescent e fokola boemong ba free state, empa hang ha e tlama ho DNA e nang le marapo a mabeli, fluorescence ea eona e eketseha haholo. Sena se etsa hore ho khonehe ho lekanya bongata ba DNA e nang le marapo a mabeli e hlahisoang nakong ea amplification ea PCR ka ho lemoha matla a fluorescence.
ROX e sebelisoa e le dae ea tokiso ho lokisa liphetoho tsa fluorescence tse sa amaneng le PCR, ka hona ho fokotsa liphapang tsa sebaka. Liphapang tse joalo li ka bakoa ke mabaka a fapaneng, joalo ka phoso ea pipette kapa mouoane oa sampole. Lisebelisoa tse fapaneng tsa ho lekanya fluorescence li na le litlhoko tse fapaneng tsa ROX, 'me sehlahisoa sena se loketse li-analyzer tsa fluorescence quantification tse hlokang tokiso e phahameng ea ROX.