Mokhoa oa ho khetha sesebelisoa sa ho futhumatsa se nepahetseng bakeng sa litlhoko tsa hau tsa lipatlisiso

Li-cycle tsa mochesoke disebediswa tsa bohlokwa ha ho tluwa tabeng ya baeloji ya dimolek'hule le dipatlisiso tsa lefutso. E tsejwang hape e le mochini wa PCR (polymerase chain reaction), sesebediswa sena se bohlokwa bakeng sa ho hodisa DNA, e leng se etsang hore e be motheo wa dikopo tse fapaneng ho kenyeletswa le ho etsa cloning, ho latellana le tlhahlobo ya tlhahiso ya lefutso. Leha ho le jwalo, ho na le dikgetho tse ngata haholo mmarakeng hoo ho kgetha thermal cycler e nepahetseng bakeng sa ditlhoko tsa hao tsa dipatlisiso e ka bang mosebetsi o boima. Mona ke dintlha tse ding tsa bohlokwa tseo o lokelang ho di nahana ha o etsa kgetho ya hao.

1. Utloisisa litlhoko tsa hau tsa lipatlisiso

Pele o teba ka ho teba ho litlhaloso tsa li-thermal cycler tse fapaneng, ho bohlokoa ho lekola litlhoko tsa hau tse ikhethileng tsa lipatlisiso. Nahana ka mofuta oa teko eo u tla e etsa. Na u sebelisa PCR e tloaelehileng, quantitative PCR (qPCR), kapa ts'ebeliso e phahameng ea ho fetisa? Ts'ebeliso ka 'ngoe ea tsena e ka hloka likarolo le bokhoni bo fapaneng ba thermal cycler.

2. Boemo ba Mocheso le Tshwano

Tekanyo ea mocheso oa thermal cycler ke ntlha ea bohlokoa. Liprothokholi tse ngata tsa PCR li hloka mohato oa denaturation ho hoo e ka bang 94-98°C, mohato oa annealing ho 50-65°C, le mohato oa katoloso ho 72°C. Etsa bonnete ba hore thermal cycler eo u e khethang e ka sebetsana le mocheso ona le hore mocheso o abuoa ka ho lekana ho pholletsa le module. Ho tšoana ho fokolang ha mocheso ho ka ama lipatlisiso tsa hau ka ho baka liphetho tse sa tsitsang.

3. Sebopeho sa boloko le bokgoni

Li-cyclers tsa mocheso li tla ka mefuta e fapaneng ea li-modular, ho kenyeletsoa lipoleiti tsa liliba tse 96, lipoleiti tsa liliba tse 384, esita le lipoleiti tsa liliba tse 1536. Khetho ea sebopeho sa li-block e lokela ho lumellana le litlhoko tsa hau tsa ho fetisa. Haeba u etsa liteko tsa ho fetisa tse ngata, u ka 'na ua hloka sebopeho se seholo sa li-block. Ka lehlakoreng le leng, bakeng sa liteko tse nyane, poleiti ea liliba tse 96 e ka ba e lekaneng. Ho feta moo, nahana hore na u hloka li-module tse ka fetoloang ka mekhoa e fapaneng, kaha sena se ka eketsa ho tenyetseha ha lipatlisiso tsa hau.

4. Lebelo le Bokgoni

Tikolohong ea kajeno ea lipatlisiso tse potlakileng, nako ke ea bohlokoa. Batla sesebelisoa sa ho futhumatsa se nang le bokhoni ba ho futhumatsa le ho pholisa ka potlako. Mefuta e meng e tsoetseng pele e ka qeta potoloho ea PCR ka metsotso e ka tlase ho 30, e leng se potlakisang mosebetsi oa hau haholo. Ho phaella moo, likarolo tse kang mokhoa o potlakileng kapa sekhahla sa ho futhumatsa ka potlako li eketsa bokhoni, li u lumella ho sebetsana le lisampole tse ngata ka nako e nyane.

5. Sebopeho sa mosebelisi le Software

Sebopeho se bonolo ho se sebedisa se bohlokwa bakeng sa tshebetso e sebetsang hantle. Batla sesebelisoa sa ho futhumatsa se nang le skrine ya ho ama e bonolo, dikgetho tse bonolo tsa mananeo, le diprothokhole tse seng di setilwe. Mehlala e tswetseng pele e ka boela ya tla le software e dumellang ho beha leihlo nako ya sebele le tlhahlobo ya data, e leng molemo haholo bakeng sa ditshebediso tsa qPCR. Etsa bonnete ba hore software e tsamaisana le ditsamaiso tsa hao tse seng di ntse di le teng mme e ka sebetsana le tlhahiso ya data eo o e hlokang.

6. Mehopolo ea Tekanyetso

Li-cyclers tsa mocheso li fapana haholo ka theko, kahoo ho bohlokoa ho ba le tekanyetso pele u qala ho reka e 'ngoe. Le hoja ho ka ba thata ho khetha khetho e theko e tlaase, nahana ka bohlokoa ba nako e telele ba ho tsetela mochining oa boleng bo holimo o fihlelang litlhoko tsa hau tsa lipatlisiso. Nahana ka theko ea pele ea theko feela, empa hape le litšenyehelo tsa lintho tse sebelisoang, tlhokomelo le ntlafatso e ka bang teng.

7. Tšehetso le Tiisetso ea Moetsi

Qetellong, nahana ka boemo ba tšehetso le tiisetso e fanoang ke moetsi. Mokhanni ea tšepahalang oa thermal cycler o lokela ho fana ka tiisetso e felletseng le ho ba le tšehetso ea bareki bakeng sa ho rarolla mathata le tlhokomelo. Sena se u bolokela nako le lisebelisoa qetellong.

ha re phethela

Ho khetha se nepahetsengsesebelisoa sa ho futhumatsaBakeng sa litlhoko tsa hau tsa lipatlisiso ke qeto ea bohlokoa e ka amang katleho ea teko ea hau. Ka ho nahana ka hloko ka litlhoko tsa hau tse ikhethileng, mefuta ea mocheso, sebopeho sa mojule, lebelo, sebopeho sa mosebelisi, tekanyetso le tšehetso ea moetsi, u ka etsa khetho e nang le tsebo e tla ntlafatsa bokhoni ba hau ba lipatlisiso le ho fumana liphetho tse tšepahalang haholoanyane. Ho sebelisa nako ts'ebetsong ena ea khetho ho tla qetella ho u putsa ka boleng le katleho ea mosebetsi oa hau oa saense.