PcR sekaseka ho rarolla bothata: khafetsa lipotso le tharollo

Chalymese Chain Reaction (Pcr) Lisebelisoa tsa Bohlokoa Ke Lisebelisoa tsa Bohlokoa tsa Billy, li lumella bafuputsi ho tsoa lipatlisisong tsa lefutso ho etsa lipatlisiso tsa lefutso. Leha ho le joalo, joalo ka sesebelisoa se rarahaneng, sebuja-molao se ka kopana le mathata a amang tšebetso ea ona. Sengoliloeng sena se bua ka lipotso tse ling tse tloaelehileng kaPRCR e sekasefiHo rarolla mathata mme o fana ka tharollo ea mathata a tloaelehileng.

1. Hobaneng ha ke etsa karabelo ea ka?

E 'ngoe ea mathata a tloaelehileng a tobaneng le basebelisi ke ho se khonehe ha PRid karabelo ea PRRund. Sena se ka hlahisoa ke lintlha tse 'maloa:

Moralo o sa nepahalang oa Primar: Etsa bonnete ba bonnete ba hore li-primers tsa hau li nepahetse bakeng sa tatellano ea sepheo ebe u na le mocheso o lekaneng oa mocheso (TM). Sebelisa lisebelisoa tsa software bakeng sa moralo oa Primar ho qoba ho sa tsebe letho.

Template e sa lekaneng DNA: netefatsa hore o sebelisa chelete e lekaneng ea template DNA. E nyane haholo e tla fella ka ho fokola kapa ho se tsebe.

Li-inhibitors sampole: lithipa-pele tsa sempole se ka kenya karabelo ea PRR. Nahana ka ho hloekisa DNA ea hau kapa ho sebelisa mokhoa o fapaneng oa ho tlosa.

Tharollo: Hlahloba moralo oa hau oa Phahameng, eketsa tlhahiso ea template, 'me u etse bonnete ba hore sampole ea hau ha e na li-inshibitors.

2. Hobaneng ha ke le sehlahisoa sa ka sa xc?

Haeba boholo ba hau ba PCR ha bo lebelletsoe, ho ka supa bothata ka maemo a karabelo kapa metsoako e sebelisitsoeng.

Khothelo e sa tobeng: Sena se ka etsahala haeba primer e tlama sebakeng se sa tšoaneng. Lekola maemo a phahameng a litaba tse sebelisang sesebelisoa se kang ho phatloha.

Mocheso o sa nepahalang oa mocheso: Haeba mocheso o ikhethileng haholo o ka ba le tlamang haholo, ha ho bonolo ho tlama. Ho khotsofatsa ha mocheso o matla ka ho ba gradient pr.

Tharollo: Netefatsa ho bua ka priceer le ho ntlafatsa mocheso o moholo ho ntlafatsa ho nepahala ha lihlahisoa tsa PCR.

3. Mohlomphehi oa ka oa Pricer o bontša molaetsa oa phoso. ke etseng?

Melaetsa ea liphoso Mohlahlobisisi oa PR PR e ka ba a tšosang, empa hangata oa fana ka leseli hore a ka fana ka maikutlo a ho a lekana.

Litaba tsa Calibration: Etsa bonnete ba hore Pri e sekaseka setsebi sa PRCR e leketla ka nepo. Ho hlahlojoa tlhahlobo khafetsa le ho lekola ho bohlokoa ho fumana litholoana tse nepahetseng.

Sehlopha sa software: Ka linako tse ling, likokoana-hloko tsa software li ka baka mathata. Qala komporo ea hau le ho hlahloba lintlha tsa software.

Tharollo: sheba bukana ea mosebelisi bakeng sa khoutu e khethehileng ea phoso mme o latela mehato e khothalelitsoeng ea ho rarolla mathata. Tlhokomelo e tloaelehileng e ka thibela mathata a mangata.

4. Hobaneng ha ho na le karabelo ea ka ea pk e felloang?

Liphetho tse sa lumellaneng le tse ka bang teng ka mabaka a 'maloa:

Boleng ba ho pheta: netefatsa hore linkhoana tsohle, ho kenyelletsa li-enzzyme, li-buffers, li na le matheba, a macha le a boleng bo holimo. Liphetho tse felileng kapa tse silafetseng li ka baka phapang.

Khanya ea Forema ea Formal Cyclenda: Litlhophiso tsa mocheso o sa lumellaneng le Maikutlo li ka ama mokhoa oa PCR. Lekola khanye ka taelo ea cyrcler cycler.

Tharollo: Sebelisa Reagents ea boleng bo holimo le ho bala setšoantšo sa hau sa mocheso khafetsa ho netefatsa sephetho se sa fetoheng.

5. Mokhoa oa ho ntlafatsa mokhoa oa karabelo ea PR

Ho ntlafatsa ts'ebetso ea karabelo ea pcc e ka lebisa tlhahisong e phahameng le liphetho tse tšepahalang.

Fana ka maemo a ho khutla: liteko li sebelisa mahloriso a fapaneng a pristors, template DNA le MGN2. Boitšoaro bo bong le bo bong ba PR bo ka hloka maemo a ikhethang a ts'ebetso e nepahetseng.

Sebelisa li-enzyme tsa ho lula li-fulule tse phahameng: Haeba ho nepahala ho tšoaea liphoso, nahana ka ho sebelisa liphoso tsa ho fokotsa liphoso nakong ea khekhe.

Tharollo: Etsa litekofatso tse phethahetseng ho fumana maemo a matle bakeng sa setha sa hau se ikhethileng sa PCR.

Ka kakaretso

Ho rarolla mathata aPRCR e sekasefiE ka ba mosebetsi o boima, empa ho utloisisa mathata a tloaelehileng le tharollo ea tsona ho ka ntlafatsa haholo boiphihlelo ba hau ba PCC. Ka ho rarolla mathata ana a tloaelehileng, bafuputsi ba ka ntlafatsa litholoana tsa pcru le netefatsa litholoana tse tšepahalang ho likopo tsa biogy tsa biogy tse ntle. Tlhokomelo e tloaelehileng, khetho e hlokolosi ka hloko, le ho ntlafatsa maemo a karabelo ke linotlolo tsa tlhahlobo ea pcr.