Tataiso ea Saense ea Lehlabula: Ha Leqhubu la Mocheso la 40°C le Kopana le Liteko tsa Limolek'hule

Mocheso o phahameng o ntse o tsoela pele ho pholletsa le boholo ba Chaena haufinyane. Ka la 24 Phupu, Shandong Provincial Meteorological Observatory e ntšitse temoso ea mocheso o phahameng o mosehla, e bolela esale pele mocheso o "tšoanang le sauna" oa 35-37°C (111-133°F) le mongobo oa 80% bakeng sa matsatsi a mane a latelang libakeng tse ka hare ho naha. Mocheso libakeng tse kang Turpan, Xinjiang, o atamela 48°C (111-133°F). Wuhan le Xiaogan, Hubei, li tlas'a temoso ea lamunu, 'me mocheso o feta 37°C libakeng tse ling. Mochesong ona o chesang, lefatše le lenyenyane ka tlas'a bokaholimo ba li-pipettes le na le litšitiso tse sa tloaelehang—botsitso ba li-nucleic acid, ts'ebetso ea li-enzyme, le boemo ba 'mele ba li-reagent kaofela li sothoa ka khutso ke leqhubu la mocheso.

Ho ntšoa ha asiti ea nucleic ho fetohile peiso khahlanong le nako. Ha mocheso oa kantle o feta 40°C, esita le ha moea o pholileng o butsoe, mocheso oa tafole ea ts'ebetso hangata o phahama ka holimo ho 28°C. Nakong ena, lisampole tsa RNA tse siiloeng sebakeng se bulehileng li senyeha ka potlako ho feta habeli ho feta nakong ea selemo le hoetla. Ha ho ntšoa li-bead tsa makenete, tharollo ea buffer e tlala sebakeng seo ka lebaka la ho fetoha ha solvent ka potlako, 'me likristale li fetoha habonolo. Likristale tsena li tla baka liphetoho tse kholo katlehong ea ho tšoaroa ha nucleic acid. Ho feto-fetoha ha li-solvent tsa organic hoa eketseha ka nako e le 'ngoe. Ha 30°C, bongata ba ho fetoha ha chloroform bo eketseha ka 40% ha bo bapisoa le 25°C. Nakong ea ts'ebetso, hoa hlokahala ho netefatsa hore lebelo la moea ka har'a hood ea mosi ke 0.5m/s, 'me u sebelise liatlana tsa nitrile ho boloka katleho ea tšireletso.

Liteko tsa PCR li tobane le litšitiso tse rarahaneng le ho feta tsa mocheso. Li-reagent tse kang enzyme ea Taq le reverse transcriptase lia utloa bohloko haholo ho feto-fetoha ha mocheso ka tšohanyetso. Ho kolobisoa maboteng a tube kamora ho tlosoa sehatsetsing sa -20°C ho ka baka tahlehelo ea ts'ebetso ea enzyme e fetang 15% haeba e kena tsamaisong ea karabelo. Litharollo tsa dNTP li ka boela tsa bontša ho senyeha ho ka bonoang kamora metsotso e 5 feela ea ho pepesehela mocheso oa kamore (>30°C). Ts'ebetso ea sesebelisoa le eona e sitisoa ke mocheso o phahameng. Ha mocheso oa laboratori o le >35°C 'me sebaka sa ho qhala mocheso oa sesebelisoa sa PCR se sa lekana (<50 cm ho tloha leboteng), phapang ea mocheso oa kahare e ka fihla ho 0.8°C. Ho kheloha hona ho ka baka hore katleho ea ho eketsa molumo moeling oa poleiti ea liliba tse 96 e theohe ka ho feta 40%. Li-filter tsa lerōle li lokela ho hloekisoa khafetsa (ho bokellana ha lerōle ho fokotsa katleho ea ho qhala mocheso ka 50%), 'me moea o pholileng o lokela ho qojoa. Ho feta moo, ha u etsa liteko tsa PCR bosiu bohle, qoba ho sebelisa sesebelisoa sa PCR e le "sehatsetsi sa nakoana" ho boloka lisampole. Ho boloka mochesong oa 4°C ka nako e fetang lihora tse 2 ho ka baka hore ho be le mouoane ka mor'a hore sekoahelo se futhumetseng se koalehe, e leng se etsang hore tsamaiso ea karabelo e be bonolo 'me se ka senya li-module tsa tšepe tsa sesebelisoa.

Ka lebaka la litemoso tse sa khaotseng tsa mocheso o phahameng, lilaboratori tsa limolek'hule le tsona li lokela ho letsa alamo. Lisampole tsa bohlokoa tsa RNA li lokela ho bolokoa ka morao ho sehatsetsi sa -80°C, 'me phihlello e lekanyelitsoe linakong tsa mocheso o phahameng. Ho bula lemati la sehatsetsi sa -20°C makhetlo a fetang a mahlano ka letsatsi ho tla mpefatsa ho feto-fetoha ha mocheso. Lisebelisoa tse hlahisang mocheso o phahameng li hloka bonyane 50 cm ea sebaka sa ho qhala mocheso mahlakoreng ka bobeli le mahlakoreng a ka morao. Ho feta moo, ho khothaletsoa ho hlophisa bocha nako ea liteko: 7:00-10:00 AM bakeng sa ts'ebetso e amang mocheso joalo ka ho ntša RNA le ho kenya qPCR; 1:00-4:00 PM bakeng sa mosebetsi o seng oa liteko joalo ka tlhahlobo ea data. Leano lena le ka thibela ka katleho litlhōrō tsa mocheso o phahameng hore li se ke tsa kena-kenana le mehato ea bohlokoa.

Liteko tsa limolek'hule nakong ea leqhubu la mocheso ke teko ea mokhoa le mamello. Tlas'a letsatsi le sa khaotseng la lehlabula, mohlomong ke nako ea ho beha pipette ea hau fatše 'me u kenye lebokose le eketsehileng la leqhoa lisampoleng tsa hau ho lumella sesebelisoa ho qhala mocheso o mongata. Tlhompho ena ea ho feto-fetoha ha mocheso ke boleng ba laboratori ba bohlokoa ka ho fetisisa nakong ea likhoeli tse chesang tsa lehlabula—etsoe, mochesong oa 40°C oa lehlabula, esita le limolek'hule li hloka "sebaka sa polar sa maiketsetso" se sirelelitsoeng ka hloko.