Tataiso ea Saense ea Lehlabula: Ha Leqhubu la Mocheso la 40 ° C le Kopana le Liteko tsa Limolek'hule

Lithempereichara tse phahameng li ntse li tsoela pele ho pholletsa le boholo ba Chaena haufinyane. Ka la 24 Phupu, Shandong Provincial Meteorological Observatory e ile ea fana ka tlhokomeliso ea mocheso o phahameng o mosehla, ea bolela esale pele mocheso oa "sauna-joaloka" oa 35-37 ° C (111-133 ° F) le 80% ea mongobo matsatsing a mane a latelang libakeng tse ka hare ho naha. Lithempereichara libakeng tse kang Turpan, Xinjiang, li atamela 48°C (111-133°F). Wuhan le Xiaogan, Hubei, ba tlas'a tlhokomeliso ea lamunu, ka mocheso o fetang 37°C libakeng tse ling. Mochesong ona o bataolang, lefatše le nang le microscopic ka tlas'a bokaholimo ba li-pipette le na le mathata a sa tloaelehang - botsitso ba li-nucleic acid, ts'ebetso ea li-enzyme le boemo ba 'mele ba li-reagents kaofela li khopamisitsoe ka khutso ke leqhubu la mocheso.

Ho tlosoa ha Nucleic acid ho fetohile peiso khahlanong le nako. Ha mocheso oa ka ntle o feta 40°C, leha ho butsoe se-air conditioner, mocheso oa tafole ea ts'ebetso hangata o feta 28°C. Ka nako ena, lisampole tsa RNA tse siiloeng sebakeng se bulehileng li nyenyefatsa ho feta habeli ho feta nakong ea selemo le hoetla. Ho ntšoa ha lifaha tsa makenete, tharollo ea buffer e tletse sebakeng sa heno ka lebaka la ho potlaka ha sehlaseli, 'me likristale li putlama habonolo. Likristale tsena li tla baka liphetoho tse kholo ts'ebetsong ea ts'ebetso ea nucleic acid. The volatility ea manyolo solvents eketseha ka nako e le 'ngoe. Ka 30°C, palo ea chloroform volatilization e eketseha ka 40% ha e bapisoa le 25°C. Nakong ea ts'ebetso, hoa hlokahala ho netefatsa hore lebelo la moea ka har'a fume hood ke 0.5m / s, le ho sebelisa liatlana tsa nitrile ho boloka ts'ireletso e sebetsang hantle.

Liteko tsa PCR li tobane le litšitiso tse rarahaneng le ho feta tsa mocheso. Li-reagents tse kang Taq enzyme le reverse transcriptase li ameha haholo ha mocheso o fetoha ka tšohanyetso. Ho koaheloa maboteng a li-tube ka mor'a hore ho tlosoe sehatsetsing sa -20°C ho ka baka tahlehelo e fetang 15% ea tšebetso ea enzyme ha e ka kena tšebetsong. Litharollo tsa dNTP li ka boela tsa bontša ho senyeha ho bonahalang ka mor'a metsotso e 5 feela ea ho pepesehela mocheso oa kamore (> 30 ° C). Tšebetso ea liletsa e boetse e sitisoa ke mocheso o phahameng. Ha mocheso o ka hare oa laboratori o le> 35 ° C 'me ho tlosoa ha mocheso oa mochine oa PCR ho sa lekana (<50 cm ho tloha leboteng), phapang ea mocheso e ka hare e ka fihla ho 0.8 ° C. Ho kheloha hona ho ka etsa hore bokhoni ba ho holisa pheletsong ea poleiti ea liliba tse 96 bo theohe ho feta 40%. Lisebelisoa tsa lerōle li lokela ho hloekisoa khafetsa (ho bokella lerōle ho fokotsa matla a ho qhala mocheso ka 50%), 'me moea o otlolohileng o lokela ho qojoa. Ho feta moo, ha u etsa liteko tsa PCR ka bosiu bo le bong, qoba ho sebelisa sesebelisoa sa PCR e le "sehatsetsi sa nakoana" ho boloka lisampole. Ho boloka ho 4 ° C bakeng sa lihora tse fetang 2 ho ka etsa hore condensation e thehoe ka mor'a hore sekoahelo se futhumetseng se koalehe, se hlapolle mokhoa oa ho itšoara le ho senya lisebelisoa tsa tšepe tsa sesebelisoa.

Ka lebaka la litemoso tse phehellang tsa mocheso o phahameng, lilaboratori tsa limolek'hule le tsona li lokela ho lla. Mehlala ea bohlokoa ea RNA e lokela ho bolokoa ka morao ho sehatsetsi sa -80°C, 'me ho na le monyetla oa ho fihlella nako ea mocheso o phahameng. Ho bula lemati la sehatsetsi -20°C makhetlo a fetang a mahlano ka letsatsi ho tla mpefatsa ho fetoha ha mocheso. Lisebelisoa tse hlahisang mocheso o phahameng li hloka bonyane 50 cm ea sebaka sa ho senya mocheso mahlakoreng ka bobeli le ka morao. Ho feta moo, ho khothaletsoa ho hlophisa bocha nako ea liteko: 7:00-10:00 AM bakeng sa ts'ebetso e baballang mocheso joalo ka ho ntšoa ha RNA le ho kenya qPCR; 1:00-4:00 PM bakeng sa mosebetsi oo e seng oa liteko joalo ka tlhahlobo ea data. Leano lena le ka thibela ka katleho litlhōrō tse phahameng tsa mocheso ho kena-kenana le mehato ea bohlokoa.

Liteko tsa limolek'hule nakong ea mocheso oa mocheso ke teko ea mekhoa le mamello. Tlas'a letsatsi le sa tsitsang la lehlabula, mohlomong ke nako ea ho beha pipette ea hau fatše 'me u kenye lebokose le eketsehileng la leqhoa ho lisampole tsa hau ho lumella sesebelisoa ho qhala mocheso o eketsehileng. Tlhompho ena ea ho feto-fetoha ha mocheso ke eona ntho ea bohlokoa ka ho fetisisa ea laboratori likhoeling tse bataolang tsa lehlabula—ha e le hantle, mochesong oa 40°C oa lehlabula, esita le limolek’hule li hloka “sebaka sa maiketsetso” se sirelelitsoeng ka hloko.